紫外分光光度法测定尿素乳膏中尿素的含量
刘炜;孙颖;曾蔚欣;刘礼斌;唐宛晨;孙路路
【摘 要】目的:建立紫外分光光度法测定尿素乳膏中尿素的含量.方法:以对-二甲氨基苯甲醛为显色剂,用紫外分光光度计在420 nm处测定吸光度.结果:尿素含量在15 ～ 120 μg/ml范围内具有良好的线性关系(r=0.999 8),平均回收率为99.2％(n=9),RSD为0.7％,重复性试验RSD为0.3％(n=6).结论:本方法简便,结果准确可靠,重现性好,可作为控制该制剂质量的主要方法.
【期刊名称】《天津药学》
【年(卷),期】2011(023)006
【总页数】3页(P19-21)
【关键词】尿素;尿素乳膏;紫外分光光度法
【作 者】刘炜;孙颖;曾蔚欣;刘礼斌;唐宛晨;孙路路
【作者单位】首都医科大学附属北京世纪坛医院,北京 100038;北京市朝阳区药品检验所,北京100023;首都医科大学附属北京世纪坛医院,北京 100038;首都医科大学附属北京世纪坛医院,北京 100038;首都医科大学附属北京世纪坛医院,北京 100038;首都医科大学附属北京世纪坛医院,北京 100038
【正文语种】中 文
【中图分类】R927.2
尿素乳膏是本院的传统制剂，该药能增加角质层的水合作用，使皮肤柔软，用于鱼鳞病，手、足皲裂及皮肤干燥等。但其现行质量标准中无主要成分的含量测定。为更好地控制该制剂质量，本研究采用紫外分光光度法测定尿素的含量[1]。
1 仪器与试药
紫外-可见分光光度仪：HP- 8453E；天平：METILER AE240。尿素对照品(中国食品药品检定研究院，批号100288-200201)；尿素原料药(湖南芙蓉制药有限公司，批号101202，含量99.7%)；尿素乳膏(首都医科大学附属北京世纪坛医院制剂室制，批号20110209、201
10605、20110607)；纯化水：自制；其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 溶液的配制
2.1.1 对二甲氨基苯甲醛溶液的配制 取对二甲基苯甲醛2 g，加乙醇96 ml与盐酸4 ml使溶解，即得。
2.1.2 尿素对照溶液的配制 精密称定尿素50 mg，置100 ml量瓶中，加入适量乙醇，完全溶解后，继续加入乙醇至刻度，摇匀，备测。
2.1.3 样品溶液的配制 取本品适量，精密称定250 mg(约相当于尿素50 mg)，置50 ml烧杯中，加乙醇20 ml，置水浴中加热使溶解，移至冰浴中冷却1 h，滤过，滤液置100 ml量瓶中，用乙醇洗涤容器及滤器，洗液并入量瓶中，放至室温，用乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，续滤液作为样品溶液，备测。
2.1.4 空白基质溶液的配制 按处方配制不含尿素的空白基质，称定250 mg，按“2.1.3”方法制备空白基质溶液，备测。
2.2 测定法 精密量取对照溶液、样品溶液和空白溶液各3 ml，分别置25 ml量瓶中，各精密加入“2.1.1”项下对二甲氨基苯甲醛溶液10 ml，用乙醇稀释至刻度，摇匀，暗处放置15 min后，立即照紫外-可见分光光度法在420 nm波长处，分别测其吸光度。
2.3 波长的选择 按“2.2”项下方法，自暗处放置15 min 后，立即照紫外-可见分光光度法在300～500 nm扫描，见图1。
A.样品溶液 B.尿素对照品溶液 C.空白溶液图1 尿素溶液紫外吸收图谱
图1可见：尿素与对二甲氨基苯甲醛显色后，在415～435 nm处有一较为平坦的吸收峰，可以作为比色测定波长。基质在415～435 nm处无吸收，对样品的测定无干扰。参照有关文献[1]，故可选择测定波长420 nm。
2.4 线性考查 分别精密量取取“2.1.2”项下配制的尿素对照溶液0.75、1.5、3.0、3.75、4.5和6.0 ml置25 ml量瓶中，再精密加入“2.1.1”项下对二甲氨基苯甲醛溶液10 ml，用乙醇稀释至刻度，摇匀。在暗处放置15 min后，立即在420 nm波长处分别测吸光度，并以浓度为横坐标、吸光度为纵坐标绘制标准曲线。求得回归方程为Y= 0.007 1 X-0.000 5(r=0.999 8)，尿素在15～120 μg/ml范围内，浓度和吸光度具有良好的线性关系。
2.5 回收率试验 精密称取尿素原料药约50 mg，加入处方量的空白基质，制成含量分别为80%、100%、120%样品，每一浓度3份，共9份。每一份样品测定6次。再按“2.1.3”样品溶液的配制方法，制备高、中、低浓度供试品溶液。取高、中、低浓度供试品溶液、尿素对照溶液各3 ml，分别至25 ml量瓶中，各自精密加入对二甲氨基苯甲醛溶液10 ml，用乙醇稀释至刻度，摇匀，暗处放置15 min后，立即在420 nm波长处分别测吸光度，得平均回收率为99.2%，RSD为0.7%，见表1。
表1 回收率试验结果加入量尿素 (mg)空白基质(mg)吸光度(A)测定值 (mg)回收率(%)50.08 0.263 2 0.359 049.9199.750.13 0.263 0 0.328 349.4098.549.98 0.263 5 0.329 349.5599.150.12 0.200 1 0.328 549.9599.750.000.198 9 0.337 649.6699.350.10 0.201 0 0.328 449.9399.750.11 0.158 4 0.330 649.3398.449.98 0.158 0 0.329 549.1598.350.10 0.157 8 0.335 850.10100.0
2.6 重复性考查 取同一批号样品6份，按“2.1.3”项下方法制备供试品溶液分别取样品溶液、尿素对照溶液各3 ml至不同的25 ml量瓶中，各自再精密加入对二甲氨基苯甲醛溶液10 ml，用乙醇稀释至刻度，摇匀，暗处放置15 min后，立即在420 nm波长处分别测吸光度。测定值的RSD为0.3%(n=6)，表明本法具有良好的重复性。
2.7 稳定性考查 取“2.5”项下配制的溶液，分别于4、8、12和24 h，测其吸光度，测定值的RSD为0.2%。
2.8 样品的测定 取样品，按“2.5”项下方法，测定尿素含量，连续测量3次。结果批号为20110209、20110605和20110607三批尿素乳膏中尿素含量分别为99.6%、94.3%和99.4%，RSD分别为0.3%、0.5%和0.2%。
3 讨论
尿素可与对二甲氨基苯甲醛形成有色化合物，但该化合物不稳定。试验中观察到尿素标准溶液加试剂显色后分别于15、30、45、60、75、90和120 min不同时间测定吸光度。结果表明，常温避光15～45 min吸光度稳定，RSD为0.08%；其60、75、90和120 min的吸光度与显色后相比，RSD分别为0.75%、1.2%、1.8%和3.1%。故测定应在15～45 min内进行。
本法测定尿素乳膏中尿素含量简便、快捷、准确、重复性好，可用于该制剂的质量控制。
参考文献
【相关文献】
1 中国药典.二部.2010：379
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