电化学方法测定羟自由基反应速度常数

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第３２卷第３期　中　国　科学技术大学学报　Ｖ０１．３２，Ｎｏ．３　２　０　０　２年６月　ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦ　ＳＣＩＥＮＣＥＡＮＤ￣文章编号：０２５３．２７７８（２（｝０２）０３—０２８８—０５　ＯＩＸＩＧＹＯＦＣＨＩＮＡ　Ｊｕｎ．２　０　０　２　电化学方法测定羟自由基反应速度常数　袁倬斌　，邹　洪２　（１．中国科学技术大学研究生院化学系，北京１０００３９；２．首都师范大学化学系，北京１０００３７）　摘要：在维生素Ｃ存在下，铁一ＥＤＴＡ与Ｈ２０２反应生成的羟自由基和脱氧核糖作用，在　酸性条件下生成丙二醛（ＭＤＡ）；ＭＤＡ与甲醛、氨通过Ｈａｎｔｚｓｃｈ反应，生成产物３，５一二　甲酰一ｌ，４一二氢吡啶．加入羟自由基“清除剂”，用电化学方法监测３，５一二甲酰一ｌ，４一二　氢吡啶的形成，以此求得羟自由基“清除剂”与羟自由基反应的反应速度常数．　关键词：Ｈａｎｔｚｓｃｈ反应；羟自由基；反应速度常数；电化学法　中图分类号：０６５７．１　文献标识码：Ａ　０引言　近年来人们越来越重视由超氧阴离子自由基、Ｈ２０，等活性氧中间体对人体的损伤而导　致的各种疾病、其中这些活性氧中间体与一些金属离子作用会产生毒性更强的羟自由基，其　对生物靶分子如ＤＮＡ或生物膜造成危害，则会引起某些疾病的发生或恶化，如癌症、衰老、　炎症等损伤．　为了研究各种“羟自由基清除剂”的清除能力，需要寻找简单、便捷的测定“羟自由基清　除剂”与羟自由基反应的二级反应速度常数的方法．目前常见的方法是通过Ｆｅｎｔｏｎ反应中产　生的羟基自由基与脱氧核糖反应，使脱氧核糖降解，在酸性溶液中加热可生成ＭＤＡ，ＭＤＡ再　与２一硫代巴比妥酸（ＴＢＡ）反应生成红色产物，测定ＭＤＡ—ＴＢＡ加合物在５３２　ＤＩＴＩ处的最大吸　收．如果先加人清除羟自由基的抗氧化剂，则ＭＤＡ的生成量将会减少，由此计算抗氧化剂与　羟自由基反应的二级反应速度常数，评价其清除羟自由基的能力＿１　Ｊ．但是糖类、氨基酸和其　它脂肪酸过氧化物也可与ＴＢＡ产生真正的ＴＢＡ—ＭＤＡ加合物，所以ＴＢＡ试验缺乏特异性，后　来人们将ＴＢＡ试验与ＨＰＬＣ法相结合，测量则更精确并更具有特异性＿２　Ｊ．　由于ＭＤＡ与醛类化合物、一级胺类化合物相互作用，通过Ｈａｎｔｚｓｃｈ反应生成３，５一二醛　基一１，４一取代的二氢吡啶化合物【０￣５　Ｊ，本文利用脱氧核糖与在Ｆｅｎｔｏｎ反应中产生的羟自由基　作用，经过降解生成ＭＤＡ，ＭＤＡ再与甲醛、氨相互作用，生成具有电化学活性的３，５一二甲酰一　１，４一二氢吡啶，通过监测Ｈａｎｔｚｓｃｈ反应产物（３，５一二甲酰一１，４一二氢吡啶）的还原峰，建立了　收稿日期：２０００－０９—２７　基金项目：国家自然科学基金（２９８７５０２７；２９６７５０２２）、中科院长春应用化学研究所电分析化学开放实验室基金　（ＯＣ９８０００３；０Ｃ２００００１）、北京市教委基金和北京市自然基金（２２９７２ｏｏ３）资助项目　作者简介：袁倬斌，男，１９３８年生，教授，博士生导师．